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基因檢測試劑盒使用注意事項

  • 發(fā)布日期:2022-06-22      瀏覽次數(shù):1893
    •   基因檢測試劑盒是根據(jù)SRY基因組的特點設(shè)計生物素標(biāo)記的引物,PCR擴增SRY基因目的片段。將SRY基因特異性寡核苷酸探針固定在尼龍膜上。根據(jù)生物素-親和素系統(tǒng)(biotin-avidin system,BAS)原理,將PCR擴增產(chǎn)物與固化在膜條上的探針雜交,洗膜后加入辣根過氧化合物酶標(biāo)記的親和素(POD),與PCR產(chǎn)物上的生物素結(jié)合。加入顯色液(TMB,H2O2),辣根過氧化物酶催化其底物H2O2分解,TMB作為供氫體參與反應(yīng)后產(chǎn)生藍色的斑點。根據(jù)雜交信號斑點的有無來判斷樣本中是否存在SRY基因。本試劑盒能有效檢測血漿中微量SRY基因。
       
        基因檢測試劑盒使用注意事項:
        1、測定中需使用的所有試劑和96孔板提前30min放置室溫溫育(否則會影響試驗準(zhǔn)確性),注意12連管必須溫育后再從平板上取下,未使用完的預(yù)包被板條應(yīng)置于有干燥劑的封口袋中密封保存;加樣時,要注意各成分加入量的準(zhǔn)確。例如,對于加入體積較大的成分來說應(yīng)保證移液器的準(zhǔn)確,而對于加樣量較小的成分,除保證移液器的準(zhǔn)確外,還應(yīng)注意盡量將液體加入已有液體的液面之下,確保成分加入。操作應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求及步驟進行,每批實驗應(yīng)保證與陰性對照和陽性對照同時進行檢測與分析,以確保檢測環(huán)境與檢測試劑性能的合格。
        2、加樣完畢后,依據(jù)試劑盒對應(yīng)耗材選擇正確且匹配的熒光PCR儀進行擴增反應(yīng)及熒光收集。試劑使用前應(yīng)充分搖勻;
        3、搖動平板混勻時注意避免樣品之間交叉污染;
        4、使用洗滌液漂洗時,洗滌液需要填滿每個小孔,進行充分漂洗;
        5、研磨好的樣品如果不能一次全部測量,可以暫時在4℃避光保存,但是建議在24h內(nèi)測定;
        6、結(jié)果判讀應(yīng)以陽性對照作為標(biāo)準(zhǔn),嚴(yán)格按照說明書進行,結(jié)果判讀請在反應(yīng)終止后15min內(nèi)完成。
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